长沙综仪生物科技有限公司
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动物血清的离心机参数需根据实验目的、样本类型及设备条件进行调整。
一、基本参数要求
1、离心动物血清时离心力(RCF)在1500~3000xg(常用2000~2500xg),离心力过低可能导致细胞残留,过高可能破坏血清成分(如溶血)。
若血液凝固不完全或含纤维蛋白,离心机的离心力可适当提高至3000~4000xg,但需避免剧烈震荡。
2、离心时间一般在10~30分钟(常规15~20分钟),若样本量较大,建议延长至30分钟;对于高脂血或黏稠样本(如牛血清),可适当延长离心时间。
3、温度:推荐4或室温。低温离心可抑制蛋白酶活性,减少蛋白降解;若是室温离心需尽快处理样本以防变质。
二、注意事项
1、样本预处理:血液采集后需静置30分钟~1小时,待充分凝固后再离心;若凝血不完全,血清中可能混入纤维蛋白,需二次离心。
2、离心管选择:避免离心管装填样品过满,防止破裂或气溶胶污染。建议使用耐高温高压灭菌,耐化学腐蚀的离心管(如聚丙烯材质)。
3、转子类型:推荐使用水平转子,分离效果更均匀,适合大体积样本。
4、避免溶血:离心前避免剧烈摇晃或冻融血液样本。离心后若血清呈粉红色(溶血迹象),需重新采集样本。
三、不同动物血清的特殊性
小型动物(如小鼠、大鼠):血液量少,建议使用小容量离心管,缩短离心时间(如2000 xg,10分钟)。
大型动物(如牛、马):血液黏度高,需延长离心时间至30分钟,或增加离心力至3000xg。
禽类或冷血动物:凝血时间可能较长,需延长静置时间至2小时以上。
四、验证离心效果
合格血清应为 淡黄色透明液体,无可见颗粒或溶血。
可通过电泳、ELISA或蛋白浓度检测评估血清质量。